椰毒假單胞菌酵米面亞種（Psedomonas cocovenenans supsp.farino fermentans)是我國發(fā)現(xiàn)的一種新的食物中毒菌，它存在于發(fā)酵的玉米、糯玉米、黃米、高梁米、變質(zhì)銀耳以及周圍環(huán)境中，它是酵米面及變質(zhì)銀耳中毒的病原菌。該菌產(chǎn)生的毒素米酵菌酸是其致病原因。

 

該食物中毒的主要癥狀，開始患者感到上腹部不適，少數(shù)出現(xiàn)腹瀉、惡心、嘔吐，嘔吐物多為咖啡色，嚴(yán)重者出現(xiàn)黃疸。昏迷、四肢抽搐、少尿、血尿、便血和尿潴留，呈現(xiàn)休克而死亡。目前尚無特效的治療辦法。

 

該菌為革蘭氏陰性桿菌，長2.5-3μm，寬0.5-1.0μm，呈桿狀、球桿狀或稍彎曲，兩端鈍圓，無芽胞，有鞭毛。

 

本菌為兼性厭氧，但易在表面生長。最適生長溫度為37，最適產(chǎn)毒溫度為26。pH5-7范圍內(nèi)生長較好。

 

本菌抵抗力較弱，565分鐘即可殺死，對各種常用消毒劑抵抗力也不強(qiáng)。

 

二、檢驗方法

 

樣品先在GVC增菌液中進(jìn)行增菌，然后劃線接種于PDA平板，挑選可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色觀察及氧化酶試驗。如為革蘭氏陰性小桿菌，氧化酶試驗陰性，再接種于卵黃瓊脂平板和SS平板。

 

從卵黃瓊脂平板上挑取卵磷脂酶陽性、并帶有彩虹環(huán)的單個菌落，接種于馬鈴薯－葡萄糖瓊脂斜面，獲得純培養(yǎng)物。

 

將純培養(yǎng)物分別接種于 Hugh-Leifson培養(yǎng)基，蛋白胨水，緩沖蛋白胨水，西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基，糖發(fā)酵管及苯丙酸培養(yǎng)基，進(jìn)行生化反應(yīng)試驗。

 

同時利用純培養(yǎng)物進(jìn)行血清分型鑒定。

 

初步鑒定為椰毒假單胞菌酵米面亞種的菌株，進(jìn)行產(chǎn)毒培養(yǎng)和小鼠毒力試驗，同時進(jìn)行米酵菌酸的測定。

 

三、說明

 

1、分離培養(yǎng)

 

該菌在馬鈴薯－葡萄糖瓊脂平板上菌落為1~2mm灰白色或乳黃色，光滑、濕潤，邊緣整齊，培養(yǎng)48h后，中心有凸起，呈草帽狀，菌落周圍產(chǎn)生黃綠色色素，擴(kuò)散到基質(zhì)中。

 

在卵黃瓊脂平板上，菌落表面光滑，濕潤，48h后，菌落周圍形成乳白色混濁環(huán)，在斜射日光下，可見環(huán)的周圍呈現(xiàn)虹彩現(xiàn)象。

 

該菌在SS瓊脂平板上不生長。

 

2、O/F試驗

 

將該菌培養(yǎng)在Hugh-leifson培養(yǎng)基，方法是挑取少量培養(yǎng)物做穿刺接種，同時接種兩支培養(yǎng)基，其中一支于接種后滴加溶化的1％瓊脂1~2mL于表面，放30培養(yǎng)。該菌為氧化型。封口培養(yǎng)不產(chǎn)酸，開口培養(yǎng)產(chǎn)酸。

 

3、本菌與假單胞菌的鑒別

 

椰毒假單胞菌酵米亞種與椰毒假單胞菌各種培養(yǎng)性狀，生物第學(xué)性狀基本一致，只在側(cè)金盞花醇的利用上有區(qū)別。椰毒假單胞菌酵米亞種側(cè)金盞花醇為陽性。

 

4、米酵菌酸的判定

 

從中毒樣品中提取米酵菌酸，包括發(fā)酵食品或變質(zhì)銀耳，或分離出的椰毒假單胞菌酵米面亞種中提取的米酵菌酸，其米酵菌酸含量必需≥0.25mg/kg（食品）才有意義。