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人B 淋巴細胞瘤細胞(RAMOS)

B 淋巴細胞瘤細胞(RAMOS)介紹:淋巴細胞瘤細胞(RAMOS)來源于一位3 歲的白人Burkitt 淋巴瘤患者;EBV 陰性;表達IL-4 受體和低親和性IgE 受體(CD23);分泌IgMlamda L);表達膜型和分泌型的免疫球蛋白。

淋巴細胞瘤細胞(RAMOS)特性

1) 來源:血液

2) 形態:淋巴母細胞樣,懸浮生長

3) 含量:>1x106 /mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規格:T25 瓶或者1mL 凍存管包裝

細胞接受后的處理:

1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25 瓶置于37℃培養約2-3h

3)棄去T25 瓶中的培養基,添加6ml 本公司附帶的完全培養基。

4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml 明舟生物(mingzhoubio)附帶的完全培養基。

5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

淋巴細胞瘤細胞(RAMOS)用途:僅供科研使用。

明舟生物(mingzhoubio)的淋巴細胞瘤細胞(RAMOS)培養操作規程,供參考

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640 培養基(RPMI-1640GIBCO,貨號11875085),90%;胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養箱濕度70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL 細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL 培養基的15ml 離心管中混合均勻。在1000RPM 條件下離心4 分鐘,棄去上清液,加入1mL 養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml 培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5 分鐘,棄去上清液,補加1-2mL 培養液后吹勻,將細胞懸液按12 15 的比例分到新的含8ml 養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按12 13 的比例分到新的含8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5 分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO 搖勻后進行凍存。

注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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