人多發性骨髓瘤外周血B淋巴細胞（RPMI 8226）介紹：沒有證據表明該細胞能產生重鏈（細胞質型或分泌型）。

人多發性骨髓瘤外周血B淋巴細胞（RPMI 8226）特性：

1） 來源：外周血 疾病：漿細胞瘤；骨髓瘤 細胞類型：B淋巴細胞

2） 形態：淋巴母細胞，懸浮生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細胞接收后的處理

1） 收到細胞后，請檢查發貨培養瓶的狀況，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時，最好在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。

3） 觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。

4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象，如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基的原培養瓶中（或新的培養瓶中）。

5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中（加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基）。

6）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代 。

人多發性骨髓瘤外周血B淋巴細胞（RPMI 8226）用途：僅供科研使用。

人多發性骨髓瘤外周血B淋巴細胞（RPMI 8226）培養操作規程，供參考

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備IMDM培養基；優質胎牛血清，20%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 換液方法：每2至3天換液，培養基可以通過添加新的培養基或替換培養基來維持。另一種方法是，通過離心分離，在5×105個細胞/ mL的培養基中培養。不要細胞密度超過2~3×106個細胞/ml，維持細胞密度在5×105和2×106的活細胞/ml。

2.將細胞懸液按1：2到1:5比例分到新皿中或者瓶中，補加培養基至6ml，放入培養箱繼續培養。

下面T25瓶為例；

3） 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

1、1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物（mingzhoubio）按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

2．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取