一．產品簡介
2、生長特性： ? 貼壁
3、細胞生長條件：
培養條件 1640+10%FBS+1%雙抗
溫度 37℃
空氣條件 5% CO2，,95% AIR
傳代方法 1:2 傳代，2~3 天換液
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
4、背景資料：該細胞系來自能移植的雄性
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤。這些細胞表達神經生長因子(NGF)受體。NGF 可誘導產生神經表型。這些細胞不合成腎上腺
素。
二．使用方法
取出 25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 細胞培養箱中靜置 3-4 小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮完全培養液繼續培養
或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后 將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3）棄上清，沉淀細胞用 12ml 完全培養基重懸，然后按 1:2 比例進行分瓶傳 代，最后放入 37℃，5%CO2
細胞培養箱中培養；
4）待細胞完全貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待
細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將 懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h 后轉 入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入 37℃ 水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用 75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含 5ml 完全培養基的 15ml 離心管中， 1000rpm 離心 5min；
3）棄上清，沉淀用 5ml 完全培養基重懸，接種 25cm2培養瓶，于 37℃， 5%CO2
細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮完全培養基繼續培養。
