| 產(chǎn)品名稱 |
人原代子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
| 商品貨號 |
MZ-249898 |
| 中文名稱 |
人原代子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
| 組織來源 |
手術(shù)切除的子宮組織 |
| 細(xì)胞形態(tài) |
鋪路石，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng) |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 培養(yǎng)基 |
子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng) |
| 細(xì)胞描述 |
子宮是女性特有器官，其微循環(huán)結(jié)構(gòu)有別于其它臟器。通常狀態(tài)下，子宮微血管排列呈樹枝狀，管徑較細(xì)，微血管之間的間距較大，子宮毛細(xì)血管與靜脈之間并不是直接連接，其間有一個(gè)竇狀隙結(jié)構(gòu)，竇狀隙壁上得纖維網(wǎng)眼，像海綿一樣，血液經(jīng)過竇狀隙時(shí)血漿向整個(gè)組織內(nèi)滲透進(jìn)行物質(zhì)交換后再回到靜脈中。 微血管作為分布最廣的血管。它是連接微動脈和微靜脈的血管。它們分支并互相吻合成網(wǎng)。管壁薄，通透性強(qiáng)。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。 微血管管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞和基膜組成。細(xì)的毛細(xì)血管橫切面由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成。 |
| 細(xì)胞凍存 |
Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
