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人髓母細胞瘤組織源性原代細胞
人髓母細胞瘤組織源性原代細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-4283
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人髓母細胞瘤組織源性原代細胞
商品貨號 MZ-4283
組織來源 中國成年病人手術后的髓母細胞瘤組織。
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 髓母細胞瘤(medulloblastoma)由Bailey 與Cushing 于1925 年首先報道,是好發(fā)于兒童的 顱內惡性腫瘤,是中樞神經系統(tǒng)惡性程度最高的神經上皮性腫瘤之一有人認為其發(fā)生是由于 原始髓樣上皮未繼續(xù)分化的結果。這種起源于胚胎殘余細胞的腫瘤可發(fā)生在腦組織的任何部 位,但絕大多數生長在第四腦室頂之上的小腦蚓部。髓母細胞瘤的細胞形態(tài)很象胚胎期的髓 母細胞,因此采用了這個名稱。在人胚胎中僅見于后髓帆,這與好發(fā)于小腦蚓部相符合。亦 認為它是起源于原始細胞胚胎細胞殘余。髓母細胞瘤占膠質瘤的8.2%,多見于兒童,男女 之比為2:1。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主要病生理變化 髓母細胞瘤柔軟易碎,邊界略可辯認。切面呈灰紅色,較大的腫瘤中央常有壞死。腫瘤 絕大多數位于小腦蚓部。突入第四腦室并常侵犯第四腦室底。從第四腦室,腫瘤阻塞導水管 及第四腦室出口,引起腦積水。髓母細胞有沿蛛網膜下腔彌漫轉移的傾向。腫瘤鄰近的軟腦 膜常被浸潤,在腦表面形成一層乳白色膠樣組織。腫瘤可轉移到椎管內及大腦表面,或沿腦 室播散到第三腦室底。
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