| 產(chǎn)品名稱 |
小鼠肝星狀細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-460 |
| 組織來源 |
正常肝組織；小鼠 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細胞形態(tài) |
梭形、多角形 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
肝臟星形細胞是小葉內(nèi)結(jié)締組織細胞，呈現(xiàn)肌成纖維細胞樣或脂肪細胞形態(tài)。他們參與肝臟細胞外基質(zhì)的穩(wěn)態(tài)，修復(fù)，再生，纖維化以有控制視黃醇的代謝，存儲和釋放。肝臟受傷后，肝臟星形細胞轉(zhuǎn)化成肌成纖維細胞樣，并且是纖維化的肝臟中 I 型膠原的主要來源。另外已發(fā)現(xiàn)在疾病狀態(tài)和肝內(nèi)門靜脈高壓的發(fā)病過程中，肝星狀細胞通過細胞收縮調(diào)節(jié)肝臟微循環(huán)。該細胞也能掌控電壓激活型鈣離子流動，表達低親和力的生長因子受體p75，并可在神經(jīng)生長因子的刺激下導(dǎo)致凋亡。因此，星形細胞激活的分子調(diào)控在將來有助于治療纖維化肝，并且能減少慢性肝病患者的發(fā)病率和死亡率。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
